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換季細(xì)胞培養(yǎng)“步步為營”：從操作到消毒的7個關(guān)鍵步驟

季節(jié)交替，尤其是在春夏之交或梅雨季來臨前后，實驗室內(nèi)環(huán)境的溫度與濕度往往會發(fā)生劇烈變化。這種變化不僅影響培養(yǎng)的穩(wěn)定性與細(xì)胞生長狀態(tài)，也顯著提高了微生物污染的發(fā)生概率。常見污染包括細(xì)菌、真菌、支原體及“黑膠蟲”，它們可能通過空氣、耗材甚至水源進入培養(yǎng)系統(tǒng)，對實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與細(xì)胞模型的可靠性構(gòu)成嚴(yán)重威脅。為保證換季期間細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定與高效，科研人員應(yīng)從污染類型與來源入手，構(gòu)建系統(tǒng)性的防污染思維體系，并在日常工作中建立“預(yù)防為主、清潔為要、應(yīng)對有方”的三重防線。本期細(xì)胞學(xué)堂將為您...

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低內(nèi)毒素DMEM高糖培養(yǎng)基 | 10%FBS支持干細(xì)胞長期傳代

Dulbecco's改良培養(yǎng)基——DMEM高糖完-全培養(yǎng)基(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)(含10%FBS)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基最初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型)，后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(...

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即用型Ham's F-12K培養(yǎng)基 | 0.1μm過濾無菌開瓶即用

Ham'sF-12K基礎(chǔ)培養(yǎng)基是Ham'sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn's改進型，在Ham'sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和丙酮酸的濃度，降低了葡萄糖的用量，并修改了鹽的成分和含量（Konigsbergs）。Ham'sF-12K培養(yǎng)基最初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。Ham'sF-12K基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。Ham'sF-12K培養(yǎng)基成分...

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DMEM/F12+HEPES | 細(xì)胞培養(yǎng)與類器官構(gòu)建基礎(chǔ)介質(zhì)

DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分，含有多種微量元素，廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng)。同時，DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)，也適用于低血清含量下哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對細(xì)胞無毒性作用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的pH范圍，可以有效的防止培養(yǎng)液pH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響。DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含HEPES）含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的...

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小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁：時間背后的“生命律動”

在細(xì)胞生物學(xué)的研究舞臺上，小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞仿若潛力無限的“種子選手”，而其貼壁生長這一初始環(huán)節(jié)，不僅關(guān)乎后續(xù)培養(yǎng)進程，更藏著精細(xì)的生物學(xué)節(jié)奏，貼壁時間受多重因素交織影響。細(xì)胞狀態(tài)堪稱根基，剛分離提取、活力充沛、純度高的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，接種到適宜培養(yǎng)皿后，通常在4-6小時便開始試探性貼壁。這些細(xì)胞帶著與生俱來的“黏附本能”，借助表面整合素等黏附分子，敏銳捕捉培養(yǎng)皿表面的膠原蛋白、纖連蛋白等“落腳點”，緩緩伸出偽足，初步錨定，開啟扎根生長之路；反之，若細(xì)胞歷經(jīng)長時間凍存...

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0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA，溶于PBS) | 500mL大包裝，降低實驗成本

胰蛋白酶（Trypsin）是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段，水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，破壞細(xì)胞間的連接，從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關(guān)，在PH8.0和37℃時，胰酶的作用能力最-強，因此使用胰酶時，應(yīng)把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%，而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度（0.05%）的胰酶進行細(xì)胞消化。由于EDTA能夠螯...

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DMEM低糖培養(yǎng)基 | 5-10%二氧化碳環(huán)境，細(xì)胞生長更穩(wěn)定

Dulbecco's改良培養(yǎng)基--DMEM低糖培養(yǎng)基（Dulbecco'sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉。DMEM培養(yǎng)基最初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。普諾賽DMEM低糖...

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2025新版無血清非程序凍存液：通過ISO13485認(rèn)證的科研級產(chǎn)品

在細(xì)胞體外培養(yǎng)工作中，為了達到長期保存細(xì)胞的生物活性的目的，須將細(xì)胞進行冷凍保存，并在實驗需要的時候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng)。目前，細(xì)胞凍存最-常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護劑使細(xì)胞緩慢降溫至指定溫度范圍，從而到達保護細(xì)胞的目的。普諾賽即用型無血清非程序凍存液是普諾賽技術(shù)團隊在長期的細(xì)胞研究過程中針對細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇不斷優(yōu)化實驗條件，面向數(shù)百種細(xì)胞研發(fā)出的專用凍存液產(chǎn)品。無血清非程序凍存液添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑，可延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降速率，防止細(xì)胞互相擠壓，影...

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