DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一種廣泛應用于細胞培養(yǎng)領域的基礎培養(yǎng)基,其特點可歸納如下:
一、營養(yǎng)均衡且濃度高
氨基酸含量豐富:DMEM培養(yǎng)基中的氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基(EMEM)的2倍,且含有非必需氨基酸(如甘氨酸),為細胞提供充足的蛋白質(zhì)合成原料。
維生素含量高:維生素含量為EMEM的4倍,參與細胞代謝的多種關(guān)鍵途徑,如能量轉(zhuǎn)換、抗氧化反應等。
碳水化合物與無機鹽:含有高濃度的葡萄糖(高糖型達4500mg/L,低糖型為1000mg/L)、無機鹽(如鈣、鎂、鐵離子)及微量元素,滿足細胞生長和代謝的多樣化需求。
二、pH值穩(wěn)定
緩沖系統(tǒng):DMEM培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng),配合5%的CO?氣體環(huán)境,可有效維持培養(yǎng)基的pH值在7.2至7.4之間,這一范圍對大多數(shù)哺乳動物細胞的生長至關(guān)重要。
丙酮酸與乳酸:部分配方中添加丙酮酸和乳酸作為輔助緩沖劑,進一步增強pH穩(wěn)定性,適用于開放式培養(yǎng)系統(tǒng)(如培養(yǎng)皿)。
三、類型多樣,適用性廣
高糖型DMEM:
葡萄糖濃度高:提供更高能量代謝支持,促進癌細胞、神經(jīng)元等高代謝需求細胞的貼壁與增殖。
適用場景:適用于生長較快、附著較困難的腫瘤細胞(如骨髓瘤細胞)、轉(zhuǎn)化細胞及高密度懸浮細胞培養(yǎng)。
低糖型DMEM:
葡萄糖濃度低:避免過量糖代謝壓力,降低乳酸積累,延長培養(yǎng)基更換周期。
適用場景:適用于原代成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞等常規(guī)培養(yǎng),以及需要控制糖代謝的實驗。
特殊配方:
無丙酮酸鈉版本:適用于對丙酮酸敏感的細胞或?qū)嶒灐?br />
無谷氨酰胺版本:滿足特定實驗需求,如谷氨酰胺合成酶缺陷細胞的培養(yǎng)。
含HEPES版本:增強緩沖能力,減少CO?依賴,適用于密閉培養(yǎng)環(huán)境(如培養(yǎng)瓶)。
四、成分可調(diào)節(jié),靈活性高
補充物添加:DMEM培養(yǎng)基本身缺乏蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和生長因子等必需成分,需通過添加胎牛血清(FBS)、生長因子、抗生素等補充物形成完整培養(yǎng)體系。常規(guī)培養(yǎng)通常需添加10%的FBS。
定制化配方:研究人員可根據(jù)實驗需求選擇合適的DMEM配方,或調(diào)整補充物種類和濃度,以滿足特定細胞類型或?qū)嶒灄l件的要求。
五、質(zhì)量穩(wěn)定,可靠性高
嚴格質(zhì)量控制:DMEM培養(yǎng)基經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制和優(yōu)化,確保成分穩(wěn)定、無菌、無內(nèi)毒素,為細胞培養(yǎng)提供可靠的基礎。
物理性質(zhì)穩(wěn)定:過濾除菌后呈淺黃色澄清液體,內(nèi)毒素含量≤1 EU/mL,滲透壓在295~340 mOsm/kg·H?O之間,符合細胞生長的理想條件。
六、應用領域廣泛
基礎研究:支持原代細胞、干細胞、轉(zhuǎn)化細胞等多種哺乳動物細胞的培養(yǎng),用于細胞生物學、分子生物學等基礎研究。
生物醫(yī)藥生產(chǎn):作為病毒宿主細胞(如Vero細胞)的擴增基質(zhì),用于疫苗生產(chǎn);支持單克隆抗體、重組蛋白等生物藥物的生產(chǎn)。
藥物篩選與毒理學研究:評估化合物對細胞的影響,為藥物研發(fā)提供實驗基礎。
基因編輯與轉(zhuǎn)染實驗:確保細胞在基因操作前后的良好生長狀態(tài),提高實驗成功率。